1．基本要求有以下幾點(diǎn):

① 無(wú)菌室應(yīng)有內(nèi)、外兩間，內(nèi)間是無(wú)菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過大，以便于空詼菌。*小內(nèi)間面積2*2. 5= 5m2，外間面積1*2= 2m2，高以2.5m下為宜，都應(yīng)有天花板。

② 在分隔內(nèi)間與外間的墻壁或隔扇上，應(yīng)開一一個(gè)小窗，作接種過程中必要的內(nèi)外傳遞物品的通道，以減少人員進(jìn)出內(nèi)間的次數(shù)，降低污染程度。小窗寬1500px、高000px>厚750px，內(nèi)外都掛對(duì)拉的窗扇。

③ 內(nèi)間應(yīng)當(dāng)設(shè)拉門，以減少空氣的波動(dòng)，門應(yīng)設(shè)在離工作臺(tái)*遠(yuǎn)的位置上;外間的]*好也用拉門，要設(shè)在距內(nèi)間*遠(yuǎn)的位置上。

④ 無(wú)菌室容積小而嚴(yán)密，使用- - 段時(shí)間后，室內(nèi)溫度很高,故應(yīng)設(shè)置通氣窗。通窗應(yīng)設(shè)在內(nèi)室進(jìn)門處的頂棚上(即離工作臺(tái)*遠(yuǎn)的位置)，*好為雙層結(jié)構(gòu)，外層為百葉窗，內(nèi)層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內(nèi)室使用后、滅菌前開啟，以流通空氣。也可安裝恒溫恒濕機(jī)。

2．無(wú)菌室內(nèi)設(shè)備和用具

① 無(wú)菌室內(nèi)的工作臺(tái)，不論是什么材質(zhì)、用途的，都要求表面光滑和臺(tái)面水平。

② 內(nèi)室應(yīng)有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、廢物筐等。

③ 在內(nèi)室和外室各安裝.個(gè)紫外燈(多為30W)。內(nèi)室的紫外線燈應(yīng)安裝在經(jīng)常工作的座位正上方，離地面2m,外室的紫外線可安裝在外室中央。(3)外室應(yīng)有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來(lái)蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。

3．無(wú)菌室的滅菌消毒

① 噴霧:在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行o噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微塵飛場(chǎng)，并有殺菌作用�？捎�5%石炭酸噴霧。(3)紫外線照射:在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應(yīng)開啟紫外線燈照射30~60mino

② 螢蒸:這是無(wú)菌室徹底滅菌的措施。無(wú)菌室使用了較長(zhǎng)時(shí)間，污染比較嚴(yán)重時(shí)，應(yīng)進(jìn)行螢蒸滅菌�？捎眉兹�、乳酸或硫磺藁蒸。

4．無(wú)菌室工作規(guī)程

① 無(wú)菌室滅菌。每次使用前開自紫外線燈照射30min以上，或在使用前30min,對(duì)內(nèi)外室用5%石炭酸噴霧。

② 用肥皂洗手后，把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口置，然后用2州煤酚皂液將手浸洗2分鐘。

③ 將各種需用物品搬進(jìn)內(nèi)室清點(diǎn)、就位，用5%石炭酸在工作臺(tái)面上方和操作員站位空間噴霧，返回外室，5~ 10min后再進(jìn)內(nèi)室工作。

④ 接種操作前，用70%酒精棉球擦手;進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)，動(dòng)作要輕緩，盡里減少空氣波動(dòng)和地面揚(yáng)塵。

⑤ 工作中應(yīng)注意安全。如遇棉塞著火，用手緊握或用濕布包裹熄滅，切勿用嘴吹，以免擴(kuò)大燃燒;如遇有菌培養(yǎng)物灑落或打碎有菌容器時(shí)，應(yīng)用浸閏5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸潤(rùn)5%石炭酸的抹布擦拭臺(tái)面或地面，用酒精棉球擦手后再繼續(xù)操作。

⑥ 工作結(jié)束，立即將臺(tái)面收拾干凈，將不應(yīng)在無(wú)菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無(wú)菌室后，對(duì)無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧，或開紫外線燈照射30min.